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病理石蠟切片心得體會范文
石蠟切片是組織學(xué)常規(guī)制片技術(shù)中最為廣泛應(yīng)用的方法。石蠟切片不僅用于觀察正常細(xì)胞組織的形態(tài)結(jié)構(gòu),也是病理學(xué)和法醫(yī)學(xué)等學(xué)科用以研究、觀察及判斷細(xì)胞組織的形態(tài)變化的主要方法,而且也已相當(dāng)廣泛地用于其他許多學(xué)科領(lǐng)域的研究中。
我從事病理技術(shù)工作剛剛一年多,細(xì)細(xì)回味自己在實(shí)際工作中的切片過程,有一點(diǎn)點(diǎn)心得體會,在這里向大家做一簡單匯報(bào)。
一、組織脫水:
要想切出一張好的石蠟切片,組織處理非常重要。經(jīng)典的脫水方法,酒精脫水,二甲苯透明,石蠟浸蠟是最簡單、方便、容易掌握,也是最便宜效果最好的方法。但脫水過程中尤其要注意的是梯度酒精脫水。在實(shí)際工作中,有時(shí)為了省事,往往采取倒掉第一缸酒精,后面往前移,這樣會導(dǎo)致第一缸酒精濃度偏高,高濃度酒精,能使蛋白質(zhì)凝固,使組織表面發(fā)硬,酒精無法滲透到組織深處,造成組織脫水效果不佳,從而不能切出優(yōu)質(zhì)石蠟切片。我的做法是,在更換液體時(shí),盡管是后邊液體往前邊倒,但一定要測量其濃度,不合適就要調(diào)整到合適為止。這樣像子宮平滑肌瘤這樣的硬組織也能切除很好的切片。
二、組織包埋:
組織包埋好壞同樣會影響石蠟切片質(zhì)量。有些小組織,特別是內(nèi)窺鏡活檢組織,如果組織沒切全,就有可能會影響診斷。因此。小組織切出優(yōu)質(zhì)切片的重要步驟是把好組織包埋這一關(guān)。首先,最好選用5x5mm或更小的包埋底模,這樣的底模即可將組織完全置于蠟塊切面的中心,又可連續(xù)切片并將蠟片撈在載撥片相對集中的區(qū)域而利于閱片診斷。另外,包埋時(shí)先把底模放入少許石蠟,將組織移放在底模里移至冰上,待石蠟略冷卻再用齒科鑷子將組織集中到一塊并按壓到一個(gè)平面后,再注滿石蠟,平移到冰臺上。
三、組織切片:
切片工藝上稍加講究,就可做到“多”、“快”、“好”、“省”。
1、先粗切所有蠟塊。用廢棄刀片將每個(gè)蠟塊粗切至組織全部暴露的最大切面,邊切邊排序,擺放在事先做好的冰盤中冷凍。
2、全部蠟塊粗切完成后,再更換新刀片細(xì)切。將冰凍好的蠟塊迅速按放固定好,先切2-3張,削去浮蠟后即可連續(xù)切片,切片時(shí)要求用力均勻柔和,搖速不宜過快或者過慢,切片厚度一般為3-5um,如為淋巴結(jié),切片厚度應(yīng)為3um,這樣鏡下細(xì)胞無重疊,清晰,透亮利于診斷。切出的蠟片先放在入40℃熱水中,在這種溫度下,蠟片迅速舒展得非常平整,再裱貼至載玻片上。采用這種方法切片,既有速度又節(jié)省刀片,最主要的是能切出高質(zhì)量的切片。
四、染色:
染色同樣會影響切片的整體質(zhì)量。染色過程中最重要的是蘇木素染色后經(jīng)鹽酸酒精分化,流水沖洗即反藍(lán)過程,時(shí)間一定要充分,否則切片再好,鏡下結(jié)構(gòu)也不夠清晰。
切片經(jīng)過染色后,通過各級酒精脫水,由低濃度到高濃度,低濃度酒精對伊紅有分化作用,時(shí)間要短,向高濃度時(shí)逐步延長脫水時(shí)間,染色經(jīng)過脫水后必須經(jīng)過二甲苯處理,這樣的切片看切來才晶瑩剔透,使閱片者賞心悅目。
以上是我在工作中得出的一點(diǎn)體會,不足之處請各位批評指正。
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